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垂直电泳槽的样品制备和装载过程
发表日期:2018/7/3 来源:托普云农 浏览次数:298次

        垂直电泳槽是用来对少量的核酸及蛋白质样品进行垂直电泳的装置,玻璃板与垫条的一体化设计确保垫条表面及垫条制胶密封端的平整,彻底防止漏液,适用于生物学研究中,对核酸、蛋白样品的分离、纯化、制备等。今天就让我们了解一下垂直电泳槽的样品制备和装载过程。

 

垂直电泳槽


        1、将试管插入至制冷恒温金属浴,以解冻冷冻牛血清白蛋白样品。 然后加入25μl 4X蛋白染料及75 μl的已解冻牛血清白蛋白溶液。
        2、把样品加样到凝胶中前,请在恒温金属浴中以95℃的温度煮沸混合好的 BSA样品、预染标记和 ProMarker,5分钟。
        3、向凝胶中装载样品前,用100μl的移液器轻轻抽放缓冲液冲洗井孔让样品孔更平滑。在把样品放入凝胶前,做简单离心与混匀保证蛋白溶液浓度不变。在每个孔中注入10μl的蛋白质样品。
        4、将安全盖安装到槽顶部,并将电极导线连接至电源。
        5、开始电泳:90V运行60分钟,130V再运行60分钟。
        6、电泳后,将胶铲插入到两玻璃板之间,轻轻来回撬动直到两板分开,把凝胶从玻璃板上移除。除去上层胶,用考马斯亮蓝溶液染色下层分离胶15分钟。
        7、将凝胶置于脱色缓冲液过夜震荡进行脱色。
        8、通过凝胶成像分析系统的紫外/白光转换板拍照。

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