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种子活力测定方法有哪些
发表日期:2022/11/23 来源:托普云农 浏览次数:212次

       种子活力是衡量种子质量的重要指标,种子活力强,才能发好芽,长出作物,那么种子活力测定方法有哪些?种子活力测定方法一般有以下几种:氯化三苯基四氮唑法(TTC法)、溴麝香草酚蓝法(BTB法)、靛红染色法、碘化钾反应法、剥胚法、纸上荧光法、抗冷法、低温法、电导法、加速衰老法。本文就给大家详细介绍以上几种种子活力测定方法。

 

       (一)氯化三苯基四氮唑法( TTC)
       1
将种子用温水(约30℃)浸泡2--6小时,使种子充分吸胀。
       2.随机取种子100粒,红花、蓖麻等具有外壳的需要去掉外壳,豆类种子要去皮。然后沿种胚中央准确切开,取一半备用。
       3.将准备好的种子浸于2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)溶液中,于恒温箱( 30~35℃)中保温30分钟。
       4.染色结束后要立即进行鉴定,因放久会褪色。倒出TTC溶液,再用清水将种子冲洗1--2次,观察种胚被染色的情况,凡种胚全部或部分被染成红色的即为具有生命力的种子,种胚不被染色的为死种子。如果种胚中非关键性部位(如子叶的一部分)被染色,而胚根或胚芽的尖端不染色,都属于不能正常发芽的种子。

 

       (二)溴麝香草酚蓝法(BTB法)
       1
浸种:同上述 TTC 法。
       2
BTB 琼脂凝胶的制备:取 0.1% BTB 溶液 100 mL 置于烧杯中,将 1 g 琼脂剪碎后加入,用小火加热并不断搅拌。待琼脂完全溶解后,趁热倒在 4 个干洁的培养皿中,使成一均匀的薄层,冷却后备用。
       3
显色:取吸胀的种子 200 粒,整齐地埋于准备好的琼脂凝胶培养皿中,种子胚朝下平放,间隔距离至少 l cm 。然后将培养皿置于 30 ~ 35 ℃下培养 1 ~ 2 小时,在蓝色背景下观察,如种胚附近呈现较深黄色晕圈是活种子,否则是死种子。
       4
计算活种子百分率。
       用沸水杀死的种子作同样处理,进行对比观察。

 

       (三)靛红染色法
       步骤同TTC染色法。
       注意事项
       1.染料的浓度要适当,染色时间不能太长(如用红墨水染色,只需要5~10分钟即可),否则不容易区别染色与否。
       2.靛红染色法测定种子生活力,适用于豆类、麻类、瓜类、十字花科、果树、乔灌木种子的生活力测定。

 

       (四)碘化钾反应法
       1.将种子在水中浸18小时。
       2.取出种子放在垫有湿滤纸的培养皿内,将培养皿置30℃恒温箱中,不同植物种子放置时间不同,如松种子放48小时,落叶松放72小时。
       3.用刀片把胚部切下,然后浸入碘碘化钾溶液中20--30分钟后,取出胚用水冲洗12分钟,然后在垫有白纸的玻璃板上进行观察。
       4.鉴别种子生活力的标准是:有生活力的种子的胚部全部染成不同程度的黑色或灰色,或者胚根部呈褐色,子叶为黄色。无生活力种子的胚部全部染成黄色,或子叶呈灰色或黑色,胚根呈黄色,或胚根末端呈黑色或灰色,而其他部分呈黄色。
       5.此法适于松属、云杉属和落叶松属的种子生活力测定。

 

       (五)剥胚法
       将种子在清水中浸泡24小时,使种皮软化,切开种皮,有胚乳的种子,还须将胚乳切开,用解剖刀和解剖针小心地取出胚。放在铺有湿润滤纸的培养皿内,每皿50粒,重复一次,放在20--25℃的温箱中,经2~10天后即可观察胚的生长情况。有生活力的胚在这段时间仍然坚实而呈白色,开始生长或转变为绿色;而死胚则变色腐烂。离体胚测定和TTC法测定一样比普通测定要快,但取胚时胚较易受伤。该法适于测定长度大于5mm种子的生活力。

 

       (六)荧光法
       1.直接观察法这种方法适用于禾谷类、松柏类及某些蔷薇科果树的种子生命力的鉴定,但种间的差异较大。用刀片沿种子的中心线将种子切为两半,使其切面向上放在无荧光的白纸上,置于紫外光灯下照射并进行观察、记载。有生活力的种子在紫外光的照射下将产生明亮的蓝色、蓝紫色或蓝绿色的荧光;丧失生命力的死种子在紫外光照射下多呈黄色、褐色以至暗淡无光,并带有多种斑点。
       随机选取20粒待测种子,按上述方法进行观察并记载有生活力及丧失生活力的种子的数目,然后计算有生活力种子所占百分数。与此同时也作一平行的常规发芽试验,计算其发芽率作为对照。
       2.纸上荧光随机选取50粒完整无损的种子,置烧杯内加蒸馏水浸泡10~15分钟令种子吸胀,然后将种子沥干,再按0.5cm的距离摆放在湿滤纸上(滤纸上水分不宜过多,防止荧光物质流散),以培养皿覆盖静置数小时后将滤纸(或连同上面摆放的种子)风干(或用电吹风吹干)。置紫外光灯下照射,可以看到摆过死种子的周围有一圈明亮的荧光团,而具有生活力的种子周围则无此现象。根据滤纸上显现的荧光团的数目就可以测出丧失生活力的种子的数量,并由此计算出有生活力种子所占的百分率。此外,可与此同时作一平行的常规种子萌发试验,计算其发芽率作为对照。
       这个方法应用于白菜、萝卜等十字花科植物种子生命力的鉴定效果好。但不适用衰老、死亡后减弱或失去荧光的种子,因此,对它们只宜采用直接观察法。
       实训结果记录分析:一般的种子可全部剥皮,取出种仁。发现的空粒、腐坏粒和病虫害粒记入表格。剥出的种仁先放人盛有清水的器皿中,待一个重复全部剥完后再一起放入染液中,使溶液淹没种仁,上浮者要压沉。

 

       (七)抗冷法
       1
将种子按普通发芽试验方法置床,每个样品重复4次。然后在10℃、黑暗条件下处理7天后,移至适宜温度下,交替光照培养6天,凡正常幼苗作为高活力种子。
       2
抗冷测定主要适用于春播喜温作物,是在发芽试验前或发芽试验期间将种子置于低温和潮湿的土壤中经一定时间的处理后,移至适宜温度下生长,模拟早春田间逆境条件,观察种子发芽成苗的能力。

 

       (八)低温法
       1
取试样200粒或400粒,分4次重复,用纱布包好,写好标签,放入冷水中(3~6℃)浸泡一定时间,然后取出进行标准发芽试验,测定种子发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数。
       2
此法是将种子浸泡在低温水中,因此,种子会受到吸胀冷害、吸胀损伤及缺氧的损害,活力低的种子经过一定时间的处理后就会丧失发芽力,而活力高的种子由于抗逆性强仍能保持其发芽力。冷浸后所测得的指标能较好地反映种子活力的高低。

 

       (九)电导法
       1
取试样两份各50粒种子,称重至小数两位,然后放入烧杯内,用量筒向各烧杯加入250ml无离子水,另一烧杯加无离子水为对照,于20℃浸泡24h,然后用电导仪测定浸出液的电导率。
       2
高活力种子细胞膜完整性好,浸入水中后渗出的可溶性物质和电解质少,浸泡液的电导率低;反之,低活力的种子细胞膜完整性差,浸泡时就会使细胞内的可溶性物质外渗,浸泡液的电导率高。

 

       (十)加速衰老法
       将200粒种子置于老化盒内的支架网上铺平,箱内加水,水面距支架6~8cm,然后加盖密封,置于规定温度(40~50℃)的种子老化箱内,经48~72h处理。期间,恒温箱也保持密闭。老化处理结束后将种子风干进行标准发芽试验,将长成正常幼苗的种子作为高活力种子。

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