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高通量组织研磨仪的酵母制备过程
发表日期:2017/9/27 来源:托普云农 浏览次数:644次

        酵母是单细胞真菌,它可以将糖发酵成酒精和二氧化碳,常被人们作为发酵剂,可用于酿造生产。为了研究酵母的品质和安全性,实验人员也会开展各种检测实验,但在此之前,实验人员会对酵母进行研磨,以便提取其中的DNA/RNA,以条形酵母为例,它是将酵母通过小孔注入到装有液体氮的气罐中压缩制成的,其研磨过程主要有:

高通量组织研磨仪


        1.首先,将有1mm的筛子扣入到装有10-20ml球状酵母的50ml破碎罐的顶部,经过离心破碎变成了2L的条状物。压力是由人工用60ml的自由活塞注射器注入罐内,条状可以在-80℃下被保存。
        2.然后,将不锈钢破碎罐、破碎球和装有条状酵母的器皿放入到用聚苯乙烯盒子盛放液体氮中,当预冷冻过程结束后,原来沸腾的液体氮恢复平静将破碎罐从池中取出,并要将破碎罐沾有的液体全部清理干净,以避免在破碎过程中发生爆炸。破碎罐、破碎球和器皿最好用有把手的煤气钳或坩锅钳拿取,而且通常要带经过冷冻的手套。
        3.再将破碎球和条状酵母移入破碎罐中。罐中装有一半的条状酵母,易碎的条状酵母被破碎球预冷冻的抹刀破碎,酵母的数量不要超过破碎罐体积的1/3,否则破碎的效率就会变得很底下。
        4.然后将破碎罐盖紧,在安装在高通量组织研磨仪之前将破碎罐再次放入到液体氮中几秒钟,然后将破碎罐夹紧。
        5.破碎次数为5次,每次3分钟,功率为30hz。在每次破碎后都要将破碎罐取下,放入到装有液体氮的水池中。当水池沸腾后,破碎可以继续进行。所需样本最后可以得到,而且也通过显微镜可以看到有价值的破碎过程。
        6.经过15分钟的破碎后,我们发现90%的酵母已经达到破碎效果。
        7.剩余的残渣被回收到50ml的器皿中以备后用或贮存。然后用一种具有永磁性的磁铁把破碎球从残渣中吸出回收。
        8.最后,将高通量组织研磨仪的破碎罐和破碎球可以用温的乙醇清洗,放到干燥处保存。

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